傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

OPM2人骨髓瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FHAD1： 叉頭相關(guān)結(jié)構(gòu)域包含蛋白1抗體 615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 兔子蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒 IgM/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

Filensin： 串珠狀纖維結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA

KC細(xì)胞，人腎癌細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2 兔子酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml

Fibromodulin： 纖維調(diào)節(jié)蛋白抗體 CDH16 Others Human 人 CDH16 / Cadherin-16 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)ELISA試劑盒 CD30(Mouse Cluster of differentiation 30)  小鼠CD30分子 96T

MAG： 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA

3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T6-Swiss albino mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒 MHC- II /H-2 II (Mouse major histocompatibility complex- II )  小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 96T

MAGE-1： 黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0378MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14)5×106cells/瓶×2 大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2(SOCS2)ELISA試劑盒 MIF(Human Macrophage Migration Inhibitory Factor)  人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子 96T

OPM2人骨髓瘤細(xì)胞HSD17B1： 羥類固醇脫氫酶17β抗體 NP Others H5N1 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人蛋白酪酸激酶(PTK/CD115)ELISA 試劑盒 HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原 0.5mg

HAUSP： 皰疹病毒相關(guān)泛素特異性蛋白酶7抗體 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2 癌細(xì)胞，Bcap-37細(xì)胞 Hce-8693(盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))

KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人蛋白聚糖(PG)ELISA 試劑盒 HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗體 CM-M050小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Tca8113-P160細(xì)胞，人舌癌細(xì)胞系 大腸埃希氏菌O157：H7 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化);PC-12(低分化) 人蛋白激酶C(PKC)ELISA 試劑盒 HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗原(N端) 0.5mg