傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

SNU-387人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho-FAK(Ser910)： 0酸化粘著斑激酶抗體 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL4 小鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 IgG whole serum 驢抗羊IgG抗血清 1ml

Phospho-FAK(Tyr576)： 0酸化粘著斑激酶抗體 正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4

PG49細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞系 轉(zhuǎn)S9基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,ZA1細(xì)胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠1,25-二羥基維生3(DHVD3)ELISA試劑盒 Donkey anti-GIgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清 1ml

FAKD3： 下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體 ACRV1 Others Human 人 SP-10 / ACRV1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

MOBP： 少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體 615小鼠癌瘤株;Ca759

KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 艱難梭菌Closidium difficile 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 LZM (Rabbit Lysozyme)  兔 96T

MRCK alpha： CDC42結(jié)合蛋白激酶α抗體 CM-H022人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

IFNA5 Protein Rat 重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 IFN- Beta/IFNB(Human Interferon Beta)  人β干擾素 96T

MyD88： 髓樣分化蛋白抗體 SRC Others Human 人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

SNU-387人肝癌細(xì)胞HuH-7(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒 CD24 CD24抗原 0.5mg

Hemopexin： 糖蛋白β-1B抗體 人支氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHBSMC cDNA

UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人基質(zhì)γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA 試劑盒 CD2AP (CD2-associated protein) 白細(xì)胞分化抗原CD2AP 0.5mg

Phospho-HSP27 (Ser15)： 0酸化熱休克蛋白27抗體 IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells 人基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 CD33/Siglec-3(mouse ret) CD33抗原(大、小鼠) 0.5mg