GIST-T1 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml

GPAM： 線粒體甘油30酸酰基轉(zhuǎn)移酶抗體 黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm 管癌細(xì)胞，BT549細(xì)胞 MA-782細(xì)胞，鼠癌細(xì)胞系

IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人酸性0酸酶(ACP)ELISA 試劑盒 IgM/Bio 標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.3ml

Glypican 6： 0脂酰基醇蛋白聚糖-6抗體 人肺動脈成纖維細(xì)胞HPAF

JEG-3/VP16細(xì)胞，人絨癌細(xì)胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,NBTF細(xì)胞 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC 人酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA 試劑盒 IgM/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml

IL16 Protein Human 重組人 IL16 / Ierleukin-16 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠內(nèi)脂素(VF)ELISA試劑盒 FS  大鼠卵泡抑素 96T

NPEPPS： 嘌呤敏感性肽酶蛋白抗體 PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

(含10mL酶解緩沖液) 1mL 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制因子(Vaspin)ELISA試劑盒 (Mouse ovarian cancer marker-CA125)  小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 96T

NSF： N-乙基順丁烯二敏感融合蛋白抗體 MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞，小鼠原成骨細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FIGF Others Mouse 小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 HD  大鼠組織蛋白去乙酰化酶 96T

GIST-T1 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞KCNT2： 鈣激活通道蛋白KCNT2抗體 rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 [CIP 104786]細(xì)胞 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)

C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 BrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷 50mg

KIR5.1： 細(xì)胞內(nèi)流通道蛋白Kir5.1抗體 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC

MES-13細(xì)胞，小鼠腎小球系膜細(xì)胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1 牛白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Beta Amyloid 29-40 β淀粉樣肽29-40(野生型) 0.1mg

phospho-KIR5.1(Ser416)： 0酸化細(xì)胞內(nèi)流通道蛋白Kir5.1抗體 CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)